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BUNSEN本生:ELISA試劑實驗細節(jié)盤點
ELISA試劑盒細節(jié)盤點
1. 樣本收集
每個標本量收集體積=100ulx檢測指標,如要做復(fù)孔,標本量收集體積=10Oul×檢測指標×2。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20°℃或-70°℃條件下保存,避免反復(fù)凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20°℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。如需離心的樣本,離心轉(zhuǎn)速不宜過高(2000~3000)
2. ELISA加樣
加樣品時,單孔用量要求: ≥50ul/指標,如需要做2個復(fù)孔則血量≥100ul/指標。如果樣本量不充足,具體用量可咨詢您的專屬銷售。
3. 樣品捕獲抗體孵育
37C恒溫孵育,避免溫度變化過大
4. 洗滌
機洗: 將25x×洗滌緩沖液稀釋成1×,1×洗滌緩沖液洗三次,每次加300uL浸泡60s手洗:手洗次數(shù)應(yīng)比機洗次數(shù)多,浸泡時間也應(yīng)適當延長
手洗容易導(dǎo)致吸附在酶標板底部的試劑脫落,從而導(dǎo)致結(jié)果偏小,手洗次數(shù)過多也會影響實驗結(jié)果,建議機洗
5. 底物顯色(TMB顯色) 孵育
TMB在使用前應(yīng)放置室溫平衡30分鐘,加的量為A、B各50uL
6. ELISA終止液終止反應(yīng)
加完TMB終止液應(yīng)讓其混勻再在酶標儀上讀數(shù)
7. 酶標儀讀數(shù)
在450nm波長處測定O.D值
8. 根據(jù)O.D值計算樣本濃度
使用軟件擬合標準曲線,根據(jù)標準曲線的擬合度(r或R2)以及殘差平方和(s)選擇合適的曲線。
ELISA試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。
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